miR-638在胃癌中表达及其与侵袭转移和预后的关系

目的探讨miR-638在胃癌患者血清及组织中的表达及其与胃癌转移及预后的相关性。方法选取234例胃癌患者的临床资料,收集手术切除的肿块,制作组织芯片,原位杂交检测miR-638在胃癌组织中的表达。同期选取20例转移性胃癌(MET组)及20例非转移性胃癌(Tumor组)患者的血样,提取血清总RNA,qRT-PCR检测miR-638在血清中的表达。分析胃癌患者的临床病理学参数(性别,年龄,肿块大小,吸烟史,TNM分期,Borrmann分型,组织学类型,淋巴结转移,远处转移,浸润深度,脉管浸润)与miR-638表达水平的关系。分析miR-638的表达水平与总生存时间(OS)和无病生存时间(DFS)的相关性。结果 miR-638在转移性胃癌患者血清中的表达水平显著低于非转移性胃癌患者(P<0.05)。miR-638表达水平与胃癌患者的组织学类型、淋巴结转移、远处转移、浸润深度、脉管浸润相关(P<0.05),miR-638的表达与胃癌患者的OS和DFS正相关,是影响胃癌生存预后的因素。结论 miR-638在转移性胃组织中的表达水平显著低于非转移性胃组织,且miR-638与胃癌的转移呈负相关,与预后呈正相关,有可能作为转移性胃癌的特异性分子标志物。     

ENBD在预防肝吸虫病患者ERCP术后并发胰腺炎的临床价值

目的观察内镜鼻胆管引流术(ENBD)预防肝吸虫性胆道梗阻内镜逆行胰胆管造影术(ERCP)术后并发急性胰腺炎的临床效果。方法收集我院因肝吸虫性胆道梗阻行ERCP治疗的患者106例,其中ENBD组65例,对照组41例,比较两组术后急性胰腺炎的发生率。结果 ENBD组术后发生急性胰腺炎3例(9.2%),对照组则为5例(29.3%),两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 ENBD能有效预防肝吸虫性胆道梗阻患者ERCP术后急性胰腺炎的发生。     

靶向CD74基因RNA干扰慢病毒稳定感染人胰腺癌细胞株的建立与鉴定

目的构建靶向CD74基因的小发夹RNA慢病毒载体,感染胰腺癌Capan-2细胞株,筛选并建立稳定细胞株。方法应用q RT-PCR法检测不同胰腺癌细胞株间CD74的m RNA表达情况;根据Gene Bank提供的CD74 c DNA序列,设计3条靶向CD74的si RNA序列,构建重组干扰质粒p SUPERretro-puro-CD74-si RNA;将重组干扰质粒转染Capan-2细胞,经过q RT-PCR和Western blot法筛选出最佳干扰效果质粒;慢病毒包装质粒并感染Capan-2细胞株,利用嘌呤霉素筛选,建立稳定低表达CD74细胞株;应用q RT-PCR和Western blot法检测CD74基因m RNA和蛋白的表达抑制率。结果 Capan-2细胞株的CD74 m RNA平均ΔCt值为102.9±6.4,在各胰腺癌细胞株中表达水平最高(P<0.05);携带干扰效果最高si RNA的慢病毒感染Capan-2细胞,建立了稳定低表达CD74基因的Capan-2细胞株,CD74基因m RNA抑制率61%,蛋白抑制率90%。结论成功筛选出靶向CD74的sh RNA最佳干扰质粒,构建了CD74-RNAi慢病毒载体,并稳定感染建立了低表达CD74基因的Capan-2细胞株。